優質生鮮奶的分為特優級、優級、良級和合格級四個等級，而分級的依據主要是檢測判斷鮮奶是否品質高的4個核心指標數值，即乳脂率、乳蛋白率、菌落總數和體細胞數。在奶業發達國家的標準里，上述四個核心指標的數值基本要達到牛奶中的乳脂肪含量不低于3.3%，乳蛋白含量不低于3.0%，體細胞數不超過75萬個/ML，菌落總數不超過10萬CFU/ML。以下是使用恒溫恒濕培養箱測定純牛奶菌落總數的一般步驟：

       1. 取樣：取10ml純牛奶置盛有90ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質袋中，用拍擊式均質器拍打1-2分鐘，制成1:10的樣品勻液。

       2. 配制濃度梯度：用1ml無菌吸管或移液槍吸取1:10樣品勻液1ml，沿管壁緩慢注于盛有9ml稀釋液的無菌試管中（注意吸管或吸頭不要觸及稀釋液面），用漩渦震蕩器混合均勻，制成10-2的樣品勻液。按上述操作程序，制備10-3、10-4系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1次1ml無菌吸管或吸頭。

       3. 接種：取一定量的稀釋液，使用無菌技術將其接種到適當的培養基上。常見的培養基包括營養瓊脂或平板計數瓊脂。

       4. 培養：將接種后的培養基放入恒溫恒濕培養箱中，設置適宜的溫度和濕度條件。一般培養溫度為 37°C，培養時間根據培養基和檢測要求而定，通常為 24-48 小時。

       5. 計數：培養結束后，觀察培養基上生長的菌落數量。可以使用計數器或手動計數方法，記錄每個稀釋度的菌落數。

       6. 計算：根據記錄的菌落數，計算出原始樣品中的菌落總數。通常使用菌落計數公式進行計算，如平板計數法或稀釋倍數法。

       7. 結果報告：將計算得到的菌落總數報告為每毫升或每克樣品中的菌落數量。

      需要注意的是，在進行菌落總數測定時，要嚴格遵守無菌操作規程，以避免外部污染對結果的影響。此外，恒溫恒濕培養箱的條件應根據具體的實驗要求進行設置和控制，以確保培養環境的穩定性和準確性。